柱层析硅胶的操作技巧(二)
柱层析硅胶,一般的柱头下边的死容积很大,许多分离的化学物质又再次被合在一起导致分离出来不成功Rf值在是多少过柱比较好,还需要看分离出来的化学物质的状况。假如物质相对性整洁,残渣点隔得很远,Rf值能够大一点也可以分离去,假如残渣点较多,tlc上间距有较为近得话,Rf值应当小一些,应该在0.1~0.2。
工作压力能够提升浸提剂的流动性速率,降低商品搜集的時间,可是会降低立柱的板式塔数。所
以别的标准同样的情况下,自然压柱是高效率的,可是時间也多,例如纯天然化学物质的分
离,一个柱头好多个月也是有的。
缓解压力柱可以减小塑料的需求量,觉得可以节约一半乃至大量,可是因为很多的气体根据
硅橡胶会使液体蒸发(有时候在柱头外边有水蒸气凝固),及其一些较为易溶解的物品很有可能得
不上,并且还务必与此同时应用离心水泵抽真空(非常大的噪声,并且时间长)。之前以前很多的过
缓解压力柱,对它有较为浓厚的情感,可是自打体验了负压后,就基本上从此不动过为自己的念
头了。
充压柱是一种比较好的方式,与自然压柱相近,只不过是另加工作压力使渗滤剂走的快些。工作压力
的保证能够是空气压缩,双连球或是小打气泵(给水族箱气路的就可以了)。措施不力轻易溶解
的试品的分离出来中可用。工作压力不能过大,要不然有机溶剂走的太快便会降低分离出来实际效果。本人感觉
充压柱在平常的有机物的分离出来中是较为可用的。
有关柱头的规格,应该是又粗又长的好是。
柱头长了,相对应的塔板数就高。柱头粗了,上样后试品的起点就小(体现在柱头上便是
试品层较为薄),那样相对性的减少了分开的难度系数。设想假如柱头十厘米,而试品就会有二
公分,那麼分开的难度系数显而易见,也许得用很低正负极的液体渐渐地冲。而假如样本层只
有0.5公分,那麼各成分就非常非常容易获得彻底脱离了。自然选用粗壮的柱头要放弃比较多
的硅橡胶和合理了,但是这种成本费相对性于商品而言或许就算不得什么了(有一些不环境保护的说,
但是废塑料炼油重蒸后也就减少了一部分消耗)。
如今看到的柱头径高比一般在1:5~10,书里写硅橡胶量是试品量的30~40倍,实际的选
择要深入分析。假如所需成分和杂物分的非常开(就是指在所需成分rf在0.2~0.4,残渣
相距0.1之上),就可以少用硅橡胶,用小柱子(比如200mg的试品,用2cm×20cm的柱头
);假如相距不上0.1,就需要增加柱头,我认为能够提升柱头的直徑,例如用3cm的,也
能够减少渗滤剂的正负极这些。
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