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柱层析硅胶的操作技巧

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柱层析硅胶的操作技巧

2021-08-25

柱层析硅胶的操作技巧都有哪些?

匀浆法:

1、秤重:200-300目硅胶,称30-70倍于上样量;倘若不容易分,还能够用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右,因而要称40g硅胶,使用量杯量100ml还能够。

2、拌和成匀浆:加上干硅胶容量一倍的有机溶液用玻璃棒充裕搅拌。倘若过柱剂是医用乙醚/甲基叔丁基醚/二甲苯体系管理,就用医用乙醚拌;倘若过柱剂是医用乙醚/醇体系管理,就用医用乙醚拌。倘若不能拌和成匀浆,说明有机溶液中水份成分非常大,尤其是甲基叔丁基醚/二甲苯,倘若不与水配搭走分配色谱分析仪的话,尽量提早用无水硫酸钠久置干燥。医用乙醚用无水氯化钙干燥,以除去1%的醇。倘若样品对酸较为比较敏感,不能用医用乙醚体系管理过柱。

3、装柱:将柱底用棉花塞紧,不必用海沙,加上约1/3容量医用乙醚(医用乙醚),装上蓄液球,打开柱下液压缸,将匀浆一次落到蓄液球内。随着着路基地基沉降,会发生一些硅胶沾在蓄液球内,用医用乙醚(医用乙醚)将其冲入柱中。

4、压实:路基地基沉降开展后,加上很多的医用乙醚,用双连球或打气泵冲装,直至流动性速率平稳。柱床约被削减至9/10容量。无论走当然压柱或冲装柱,都应进行这一步,可使分离度提高 很多,且还能够避免过柱时由于柱床委缩导致开裂。

柱层析硅胶

5、上样:干试湿试都可以。海沙是没必要的。上样后,加上一些过柱剂,再将一团棉球塞至接近硅胶表面。接着就可以放心地加上许多过柱剂,而不易毁坏硅胶表面。

6、过柱和收集:柱层析实际上是在扩散和提取正中间的考量。太低的过柱抗拉强度并不大好,推荐用方向导数过柱。收集的例子:10mg上样量,1g硅胶H,0.5ml收一减压渣油;1-2g上样量,50g硅胶(200-300目),20-50ml收一减压渣油。

7、检测:要很多地运用专用喷显剂,倘若仅用紫外线消毒灯,会耗损较多产品,紫外光的敏感性一般比喷显剂底1-2个数量级。

8、送谱:收集的产品旋干,在送谱前一般务必 重结晶。倘若样品太少或是是为液体,可过一小凝胶柱,作为送谱前的纯化方法。可除去氢谱1.5ppm左右简言之的“硅胶”峰。

干试上样,一般用于固体或粘度大的液体样品。样品用低溶点可溶解有机溶液溶化,加上1-3倍的粗硅胶,晾干或旋干,干燥的国家标准是硅胶成细粉而不粘在瓶内腔。安上的柱顶上留一段有机溶液,把吸咐了样品的硅胶慢慢地到进去,震动柱顶或再加上一些有机溶液,把粘在柱内腔的硅胶洗下。

在装柱顶的情形下,不论是湿试或者干试装,用节橡皮管边装边敲打,那般可以把柱顶装的比较匀,仅有柱顶装得匀,提取预期效果可以好。


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