柱层析硅胶的操作技巧都有哪些？

匀浆法：

1、秤重：200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；倘若不容易分，还能够用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右，因而要称40g硅胶，使用量杯量100ml还能够。

2、拌和成匀浆：加上干硅胶容量一倍的有机溶液用玻璃棒充裕搅拌。倘若过柱剂是医用乙醚/甲基叔丁基醚/二甲苯体系管理，就用医用乙醚拌；倘若过柱剂是医用乙醚/醇体系管理，就用医用乙醚拌。倘若不能拌和成匀浆，说明有机溶液中水份成分非常大，尤其是甲基叔丁基醚/二甲苯，倘若不与水配搭走分配色谱分析仪的话，尽量提早用无水硫酸钠久置干燥。医用乙醚用无水氯化钙干燥，以除去1%的醇。倘若样品对酸较为比较敏感，不能用医用乙醚体系管理过柱。

3、装柱：将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加上约1/3容量医用乙醚（医用乙醚），装上蓄液球，打开柱下液压缸，将匀浆一次落到蓄液球内。随着着路基地基沉降，会发生一些硅胶沾在蓄液球内，用医用乙醚（医用乙醚）将其冲入柱中。

4、压实：路基地基沉降开展后，加上很多的医用乙醚，用双连球或打气泵冲装，直至流动性速率平稳。柱床约被削减至9/10容量。无论走当然压柱或冲装柱，都应进行这一步，可使分离度提高 很多，且还能够避免过柱时由于柱床委缩导致开裂。

5、上样：干试湿试都可以。海沙是没必要的。上样后，加上一些过柱剂，再将一团棉球塞至接近硅胶表面。接着就可以放心地加上许多过柱剂，而不易毁坏硅胶表面。

6、过柱和收集：柱层析实际上是在扩散和提取正中间的考量。太低的过柱抗拉强度并不大好，推荐用方向导数过柱。收集的例子：10mg上样量，1g硅胶H，0.5ml收一减压渣油；1-2g上样量，50g硅胶（200-300目），20-50ml收一减压渣油。

7、检测：要很多地运用专用喷显剂，倘若仅用紫外线消毒灯，会耗损较多产品，紫外光的敏感性一般比喷显剂底1-2个数量级。

8、送谱：收集的产品旋干，在送谱前一般务必 重结晶。倘若样品太少或是是为液体，可过一小凝胶柱，作为送谱前的纯化方法。可除去氢谱1.5ppm左右简言之的“硅胶”峰。

干试上样，一般用于固体或粘度大的液体样品。样品用低溶点可溶解有机溶液溶化，加上1-3倍的粗硅胶，晾干或旋干，干燥的国家标准是硅胶成细粉而不粘在瓶内腔。安上的柱顶上留一段有机溶液，把吸咐了样品的硅胶慢慢地到进去，震动柱顶或再加上一些有机溶液，把粘在柱内腔的硅胶洗下。

在装柱顶的情形下，不论是湿试或者干试装，用节橡皮管边装边敲打，那般可以把柱顶装的比较匀，仅有柱顶装得匀，提取预期效果可以好。