欢迎访问青岛硕远硅胶科技有限公司网站!

全国咨询热线

400-6052-977

薄层层析硅胶

资讯动态

联系我们

青岛硕远硅胶科技有限公司

业务一部:15265203977   

业务二部:15192683977

业务三部:15908973977

业务四部:15192622177

售后电话:15192685877

技术电话:18366268899

服务监督电话:15192661599 

座机:0532-87819577

传真:0532-87810277 

邮箱: shuoyuanchina@163.com

网址:www.syhgchina.com

阿里网址一:shuoyuanchina.1688.com

阿里网址二:chinashuoyuan.1688.com

公司地址:山东省青岛市城阳区上马街道岙东中路438号


柱层析硅胶分离净化的实验技巧和方法

您当前的位置 : 首 页 > 资讯动态 > 技术支持

柱层析硅胶分离净化的实验技巧和方法

2022-06-25

 依据添充栽培基质和试品分派互换基本原理不一样,离子交换法层析,疑胶过虑层析和亲和层析是三种分离出来化合物的經典层析技术。

柱层析硅胶分离出来净化处理的试验方法和方式

1、柱层析操作步骤的挑选

现阶段,柱色谱仪分离出来的操控方法,关键包含自然压分离出来、缓解压力分离出来和充压分离出来3种方式。自然压分离出来是容易的分离出来方式便捷、简易,可是过柱时间长。缓解压力分离出来虽然能节约填充料的需求量,可是因为很多的气体根据填充料会使有机溶剂蒸发,而且有时候在柱头外边会出现水蒸气凝固,及其有一些易溶解的化学物质也无法获得,并且还需要一起应用离心水泵或机械泵抽真空。充压分离出来能够 加速渗滤剂的流通速率,减少试品的过柱時间,是一种比较好的方式 ,与自然压柱相近,只不过是另加工作压力使渗滤液迅速过柱。工作压力的保证能够 是空气压缩,双连球或是小打气泵等。

2、柱头规格型号的挑选

销售市场上面有各种规格型号的柱层析分离出来柱。柱头长了,相对应的塔板数就高,分离出来就行。现阶段市場上的柱头,其径高比一般在1:5~10范畴,在具体应用时,填充料量一般是试品量的30~40倍,实际的选用要依据试样的特性和成分开展深入分析。假如所需成分和残渣的分离度很大,就可以降低填充料量,应用內径相对性较小的柱头(如2cm×20cm的柱头);假如Rf相距不上0.1,就需要增加柱头,提升填充料量,例如用3cm內径的柱头。

3、装柱

柱层析离子交换柱的装填关键有湿式和干式二种,湿式方便,一般用渗滤剂融解试品,还可以用二氯甲烷、乙酸丁酯等,但有机溶剂越低越高,要不然有机溶剂就变成渗滤剂了。柱头底端活塞杆一定不必涂润滑液,不然会被渗滤剂送到渗滤液中,能够 选用聚四氟乙烯原材料的闸阀。干式和湿式装柱没有什么实际性区别,只需可以把柱头装实就可以了。装好的柱头应当有适当的密切(太密了渗滤剂流动速度很慢),而且一定要匀称,要不然试品便会从一侧斜着流动性。与此同时柱中不可以有很大汽泡,大部分状况下有一些气泡没很大的危害,由于只需充压汽泡就可消退。可是柱头更避讳的是裂开,裂开会影响到分离出来实际效果,乃至损毁。

柱层析硅胶

4、有机溶剂的挑选

挑选一个适合的有机溶剂系统软件是柱层析分离出来的重要。在采用柱层析过柱剂时首先要考虑到三个层面的要素:溶解度(Solubil2ity)、亲合性(Affinity)和分离度(Resolution)。有机溶剂应挑选质优价廉、安全性、环境保护的,能够 考虑到乙醚、乙酸丁酯、二氯甲烷、医用乙醚、工业甲醇和正己烷这些。但正己烷价钱较高,医用乙醚很容易挥发,二氯甲烷和工业甲醇与硅橡胶的吸咐是一个放热反应全过程,易使柱头造成汽泡。别的的有机溶剂用的相对性较少,要依不一样需要挑选。此外值得一提的是,因为大家开展的是痕量元素剖析,渗滤剂的含量务必关心,一般应用农残级或HPLC级的,如果是分析纯的需要开展特制。与此同时有机溶剂在过柱后是回收利用应用,一方面环境保护,另一方面也可以节约一部分经费预算。

5、上样

用少许的溶液融解试品加样,加满后将底端活塞杆开启,待有机溶剂层降低至石英沙面时,再加少许的低性溶剂,随后再开启活塞杆,这般两三次,一般石英沙就基本上是灰白色的了。添加渗滤剂,一开始不必充压,等融解试品的有机溶剂和试品层有一段距离(2~4cm),再充压,那样规避了有机溶剂(如二氯甲烷等)带入试品迅速下滑。许多 试品在上柱前黏性很大,上样后在柱上又会进行析出,这一般全是较为很多的试品才会发生,是由于填充料对试样的吸咐饱和状态而致。有一些试品溶解度差,能融解的有机溶剂(例如DMF,DMSO等)又不可以上柱,那样就一定用干式上柱了。

6、渗滤液的搜集和浓缩

用硅橡胶作固定不动相过柱子的基本原理是一个吸咐与解析的均衡。假如试品与硅橡胶的吸咐较为强得话,就不易排出,这时候能够 选用三氧化二铝作固定不动相。柱层析后的渗滤液,因为采用了较多的有机溶剂,务必开展浓缩,假如待测物具备一定的挥发物,是应用自然压蒸发有机溶剂,不然易造成检验结果显示稍低。


标签

最近浏览:

青岛硕远硅胶科技有限公司

业务一部:15265203977   

业务二部:15192683977        

业务三部:15908973977         

业务四部:15192622177           

售后电话:15192685877    技术电话:18366268899

服务监督电话:15192661599   座机:0532-87819577

传真:0532-87810277      邮箱: shuoyuanchina@163.com      

网址:www.syhgchina.com

阿里网址一:shuoyuanchina.1688.com

阿里网址二:chinashuoyuan.1688.com

公司地址:山东省青岛市城阳区上马街道岙东中路438号

关注我们

微信图片_20240719152258.png  微信图片_20240719115059.png微信图片_20240719152302.png   微信图片_20240719115059.png三部.png   
业务一部
业务二部
业务三部