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柱层析硅胶时装柱的的注意事项

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柱层析硅胶时装柱的的注意事项

2021-11-10

装柱子的技巧

柱层析硅胶的装柱非常重要,装柱的效果会直接影响层析分离效果。有湿法装柱和干法装柱等两种方法。湿法装柱很简单,使用也Z普遍,就是先用比固定相多一倍的洗脱剂将固定相活成匀浆,柱子底部先用脱脂棉塞紧,然后倒入洗脱剂将脱脂棉中气泡赶出。欢迎关注化学科讯。用漏斗将活好的固定相倒入柱子中,打开底部活塞,将柱子中高出固定相的溶剂放出。期间不断用橡皮棒敲打,将固定相敲实,做到密实均匀无气泡即可。很多时候用加压的方法可以很高效地装好柱子,而且在柱子中没有气泡产生。干法装柱与湿法装柱刚好相反的是,它是将干燥的吸附剂从柱子上端直接加入到一个空的柱子中,然后用油泵抽柱子底部,相当于减压过柱,直到柱子变得很结实,再用淋洗剂“走柱子”。干法装柱的一个缺点就是在装入洗脱剂后,由于溶剂和固定相之间的吸附放热,所以柱子容易变花,影响分离效果。

柱层析硅胶

解决的方法是:(1)固定相一定要添加结实;(2)一定要用较多的溶剂“走柱子”。直到柱子的下端不再发烫,恢复到室温后再撤去压力。无论使用哪种方法装柱,Z后都要求所装的柱子结实、匀称、无气泡。


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