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柱层层析硅胶厂家讲解色谱分离技术

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柱层层析硅胶厂家讲解色谱分离技术

2019-08-30

色谱分离技术又称层析分离技术或色层分离技术,是一种分离复杂混合物中各个组分的有效方法。它是利用不同物质在由固定相和流动相构成的体系中具有不同的分配系数,当两相作相对运动时,这些物质随流动相一起运动,并在两相间进行反复多次的分配,从而使各物质达到分离。

      色谱有多种,按固定相类型和分离原理可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、亲和色谱、大孔吸附树脂、凝胶色谱、聚焦色谱等。常用的是吸附色谱分离技术。

     吸附色谱法是指混合物随流动相通过吸附剂(固定相)时,由于吸附剂对不同物质具有不同的吸附力而使混合物中各组分分离的方法。此法特别适用于脂溶性成分的分离。被分离的物质与吸附剂、洗脱剂共同构成吸附层析的三要素,彼此紧密相连。

柱层层析硅胶厂家讲解色谱分离技术

      常用的极性吸附剂有:硅胶、氧化铝。硅胶显弱酸性,适于分离酸性和中性化合物,分离生物碱时需在流动相中加入适量的有机碱;氧化铝呈碱性,适于分离生物碱等碱性成分,不宜用于分离有机酸等酸性成分。极性吸附剂的吸附作用有以下特点。 

     1.被分离物质极性越强,吸附力越强。强极性溶质将优先被吸附。

     2.溶剂极性越弱,则吸附剂对溶质的吸附能力越强。随溶剂极性的增强,则吸附剂对溶质的吸附力将减弱。

     3.当加入极性较强的溶剂后,先前被硅胶或氧化铝所吸附的溶质可被置换而洗脱出来。

     活性炭是常用的非极性吸附剂。活性炭对非极性物质具有较强的亲和力,在水中对溶质表现出强的吸附能力。从活性炭上洗脱被吸附的物质时,溶剂的极性越小,洗脱能力越强。

柱层层析硅胶厂家讲解色谱分离技术

     一般化合物的极性按下列官能团的顺序增强:

        —CH2—CH2—,—CH==CH—,—OCH3,—COOR,>C==O,—CHO,—NH2,—OH,—COOH。

    溶剂的极性可大体根据介电常数的大小来判断。介电常数越大,则极性越大。一般溶剂的介电常数按以下顺序增大:环已烷(1.88),苯(2.29),无水乙醚(4.47),氯仿(5.20),乙酸乙酯(6.11),乙醇(26.0),甲醇(31.2),水(81.0)。

     吸附色谱的操作方式主要有薄层色谱法和柱色谱法。薄层色谱法是将吸附剂均匀铺在玻璃上,点样,然后用合适的展开剂展开而达到分离、鉴定和定量的目的。柱色谱是将待分离的样品均匀加入到装有固定剂填料的柱子内,再以适当的洗脱剂洗脱以达到不同成分的分离。 

    色谱分离技术常用于功能性的分离精制。例如,柱层层析硅胶厂家从茶叶中提取茶多酚时可采用层析法分离除去咖啡因及其他不纯物;从橘皮的超临界萃取液中分离提取类胡萝卜素;从芝麻粕提取液中分离提取木聚糖;从蔗糖的酶处理液中分离精制低聚果糖;从牛初乳中分离提取乳铁蛋白;从磷虾酶解残渣抽提液中分离提取虾黄素、卵磷脂等。


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