柱层析硅胶操作方法：

匀浆法：

1.称重:200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果很难区分，也可以用100倍的硅胶H。干硅胶的视密度约为0.4，所以可以称之为40g硅胶，烧杯量为100毫升。

2.搅拌均匀浆料：用玻璃棒充分搅拌干硅胶体积的两倍溶剂。如果洗涤剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮系统，则与石油醚混合；如果洗涤剂是氯仿/醇系统，则使用氯仿。如果不能搅拌均匀浆料，则表明溶剂含水量过高，特别是乙酸乙酯/丙酮。如果不与水配伍，则须提前用无水硫酸钠长期干燥。氯仿用无水氯化钙干燥，以去除1%的醇。如果样品对酸敏感，则不能使用氯仿系统通过柱。

3.安装柱子：用棉花塞住柱子底部，无需使用海砂。加入约1/3体积的石油醚（氯仿），安装储液球，打开柱下活塞，一次将匀浆倒入储液球中。随着沉降，一些硅胶会粘在储液球上，并用石油醚（氯仿）冲入柱中。

4.压实：沉降完成后，加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定。柱床大约被压缩到9/10体积。无论是常规压力柱还是加压柱，都应采取这一步骤，这可以大大提高分离度，避免柱床柱时萎缩引起的开裂。

5.样品：干湿法可以。海沙是不必要的。取样后，加入一些洗涤剂，然后将一团脱脂棉塞到硅胶表面附近。然后你可以添加大量的洗涤剂，而不会破坏硅胶表面。

6.过柱和收集：柱层分析实际上是扩散和分离之间的权衡。洗涤强度过低不好。建议使用梯度洗涤。收集例：10mg样品量，1g硅胶H，0.5ml蒸馏；1-2g样品量，50g硅胶（200-300目），20-50ml蒸馏。

7.检测:多使用专用喷雾剂。如果只使用紫外线灯，会损失更多的产品。紫外线的灵敏度一般比喷雾剂底部高1-2个数量级。

8.发光谱：收集到的产品通常需要在发光谱新结晶。如果样品太少或液体，可以通过一个小凝胶柱作为送谱前的净化手段。所谓的硅胶峰可以去除氢谱约1.5ppm。

干式样品一般用于固体或高粘度的液体样品。样品用低沸点易溶剂溶解，加入1-3倍厚硅胶，干燥或旋转干燥。干燥的标准是将硅胶制成细粉，而不是粘在瓶壁上。在安装好的柱子上留下溶剂，慢慢进入吸附样品的硅胶，振动柱子或添加一些溶剂，清洗粘在柱壁上的硅胶。

安装柱子时，无论是湿法还是干法，用节橡胶管敲打，使柱子安装均匀。只有柱子安装均匀，分离效果才能好。

一般柱下的死体积太大，太大，许多分离的物质被重新组合在一起，导致分离失败。RF值超过柱，这取决于分离化合物的情况。如果产品相对干净，杂质点相距较远，则RF值可以较大或分离。如果杂质点较多，TLC距离较近，RF值应较小，为0.1~0.2。

压力可以提高洗涤剂的流动速度，减少产品收集时间，但也可以减少柱子的塔板数量。

当其他条件相同时，常压柱效率高，但时间也长，如天然化合物的点。

离开，一根柱子个月也有。

减压柱可以减少硅胶的使用，感觉可以节省一半或更多，但由于大量的空气通过。

硅胶会使溶剂挥发（有时在柱外有水蒸气凝结），以及一些更容易分解的东西。

不，还须同时使用泵(噪音大，时间长)。以前有很多。

减压柱，对它有很深的感情，但自从尝试加压以来，几乎再也没有动过减压的念头。

头了。