1.柱层析硅胶一般操作方法

1.1.称重。200-300目硅胶材料，称30-70倍于上样量；假如不易分，还可以用100倍量的硅胶材料H。干硅胶的视密度在0.4上下，因此要称40g硅胶材料，用量杯量100ml还可以。

1.2.搅拌成匀浆。添加干硅胶材料容积一倍的有机溶剂用玻璃棒充足拌和。假如冲洗掉剂是乙醚/乙酸丁酯/甲苯管理体系，就用乙醚拌；假如冲洗掉剂是乙醚/醇管理体系，就用乙醚拌。假如不可以搅拌成匀浆，表明有机溶剂中水分含量很大，尤其是乙酸丁酯/甲苯，假如不与水搭配走分派色谱仪得话，务必事先用无水硫酸钠久置干躁。乙醚用无水氯化钙干躁，以去除1%的醇。假如试品对酸比较敏感，不能用乙醚管理体系过柱。

1.3.装柱。将柱底用棉絮塞紧，无须用海沙，添加约1/3容积乙醚（氯仿），装上蓄液球，开启柱下活塞杆，将匀浆一次落于蓄液球内。伴随着地基沉降，会出现一些硅胶材料沾在蓄液球内，用乙醚（氯仿）将其冲入柱中。

1.4.夯实。地基沉降进行后，添加大量的乙醚，用双连球或打气泵充压，直到流动速度稳定。柱床约被缩小至9/10容积。无论自然压柱或充压柱，都应开展这一步，可使分离度提升许多，且可以防止过柱时因为柱床衰老造成裂开。

1.5.上样。干式干法都能够。海沙是没必要的。上样后，添加一些冲洗掉剂，再将一团脱脂棉塞至贴近硅胶材料表层。随后就可以安心地添加很多冲洗掉剂，而不容易损坏硅胶材料表层。

1.6.过柱和搜集。柱层析事实上是在蔓延和分离出来中间的衡量。太低的冲洗掉抗压强度并不太好，强烈推荐用梯度洗脱。搜集的事例：10mg上样量，1g硅胶材料H，0.5ml收一减压渣油；1-2g上样量，50g硅胶材料（200-300目），20-50ml收一减压渣油。

1.7.检验。要大量地应用专用型喷显剂，假如仅用紫外线杀菌灯，会损害较多商品，紫外光的敏感度一般比喷显剂低1-2个量级。

1.8.送谱。搜集的商品旋干，在送谱前通常需要重结晶。假如试品太少或者是为液态，可过一小疑胶柱，做为送谱前的提纯方式。可去除氢谱1.5ppm上下所说的“硅胶”峰。