一、立柱安装

操作要点：安装塔前，塔底应垫一层吸水棉，防止吸附剂泄漏

有两种方法加载柱干法和湿法。

（1） 干柱装填：薄层层析硅胶通过漏斗装入柱内，中间不间断，慢慢形成细流在管子里。也可以用橡胶电缆轻敲硅胶柱，使硅胶填充连续、均匀、致密。柱填料

之后，打开下端活塞，倒入洗脱液，将柱内空气排出，保持一定的液位。

（2） 湿柱装载：将准备好使用的洗脱液装载到柱中，打开下活塞进行洗脱探员慢慢地流了出去。然后将硅胶缓慢且连续地倒入柱中（或将硅胶与适当的洗脱液混合制备的悬浮液缓慢地加入柱中的小硅胶中，并在重力和洗脱液的驱动下在柱中自由沉降。在此期间，流出的洗脱液应连续添加回柱中，以保持一定的液位，直到硅胶完全添加并放入柱中。内部结算不会改变。然后在硅胶上加一小块滤纸或一点吸水棉。根据样品在控制洗脱液液位到一定高度。

均质：搅拌成匀浆。加入两倍于干硅胶体积的溶剂，用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱液为石油醚-乙酸乙酯/丙酮体系，则将其与石油醚混合；如果洗脱液为氯仿/酒精系统，与氯仿混合。如果不能搅拌成匀浆，则溶剂中的水太大，特别是乙酸乙酯/丙酮，若与水不相容，须事先用无水硫酸钠除去分配色谱晾干。氯仿用无水氯化钙干燥以除去1%的酒精。如果样品对酸敏感，则不能使用。

二、装载样品

将待分离样品溶于绍里柱装样时所用的洗脱液中，制备体积小、浓度高的样品。将溶液加入色谱柱中的硅胶表面。如果样品不溶于柱载用的洗脱液，则溶解样品在挥发性溶剂中，加入硫柳汞（不多过柱中硅胶总量的1/10），并与之充分混合。除去溶剂后，将与样品混合的硅胶均匀地添加到柱的顶部（始终保持洗脱液在恒定水平）用另一层硅胶覆盖以装载样品。注意沿柱内壁缓慢加入，吊装后硅胶上端面应保持平整。上面样品中的硅1/60~1/30胶水。

三、洗脱

用薄层色谱法可以选择洗脱剂，当ILC形成时，Rf值为0.20.3。以试剂体系为洗脱体系，采用梯度洗脱法进行洗脱。首先，打开柱下端的活塞，保持洗脱液流速为每秒12滴。上端连续加入洗脱液（可如果单一溶剂的洗脱效果不好，可以混合溶剂洗涤（一般不过三种溶剂）通常采用梯度洗脱。洗脱液洗脱能力逐渐由弱变强。

四、收集和处理

洗提液按等份收集，每次收集使用的薄层层析硅胶量大致相等。每种洗脱液都很薄层质检查，结合含有相同成分的洗脱液。经过浓缩和再结晶，通常可以得到单体成分。如果仍然是几个单体组分的混合物，则单体组分的结晶不易分离出来。你需要进一步的色谱分析或用其他方法分离。