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层析硅胶时吸附剂的影响

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层析硅胶时吸附剂的影响

2021-12-09

常说的柱子应当叫柱层析分离出来,也叫柱层析。大家常见的是以硅胶材料或三氧化二铝作固定不动相的吸咐柱。因为层析硅胶的工作经验比较多,因此下边就两年来层析硅胶的感受写些体会心得,希望能有一定的帮助。

1、吸收剂

常见的吸收剂有三氧化二铝、硅胶材料、轻质氧化镁、碳酸氢钙和活性碳等:吸收剂一般要通过提纯和活力解决,颗粒物尺寸理应匀称。对吸收剂而言颗粒小、面积大,吸咐水平就高,可是颗粒物钟头,有机溶剂的流动速度就很慢,因而应依据具体分离出来根据需求而定。供柱色谱仪应用的三氧化二铝有酸碱性、中性化和偏碱3种。酸碱性三氧化二铝是用1%硫酸泡浸后,用纯净水洗至三氧化二铝的混液pH为4,用以分离出来酸性物质;中性化三氧化二铝的pH约为7.5,用以分离出来中性化成分;偏碱三氧化二铝的pH约为10,用以胺或其他偏碱化学物质的分离出来。

因硅胶材料有点酸碱性,只有用以对酸不脆弱的化学物质的分离出来。常见300-400目地柱硅胶材料或H硅胶材料。若化学物质的Rf值相距比较大,则可考虑到应用200-300目硅胶材料以加速层析速率。

另:因吸收剂的比表面比较大,湿气大时或长期性置放中吸咐的水份会对分离出来实际效果造成很大的危害(等同于大大增加了固定不动相的正负极造成试品离不开),因而应将吸收剂放进90~100度烘干箱内烘2小时后,取下在空气干燥器中制冷后再应用。应用的硅胶材料,无需时一定要密封性,避免受潮。TLC常用的环氧树脂板一定要储存在空气干燥器里边,或应用前在红外线烘干箱里干躁一段时间。

层析硅胶

2、物质的量浓度的结构特征与吸咐工作能力的关联

化学物质的吸附力与他们的正负极正相关,化学物质分子结构中带有正负极比较大的官能团时,吸附力也较强,三氧化二铝对各种各样化学物质的吸附力按下列顺序下降:

酸和碱>醇、胺、碳醇>酯、醛、酮>芳香烃>卤代物、醚>烯>饱和烃

3、柱头可以分成:充压,自然压,缓解压力。

工作压力可以提升浸提剂的流通速率,降低商品搜集的時间,可是会降低立柱的板式塔数。因此别的情况一样的情况下,自然压柱是效率是很大的,可是時间也Z多,例如纯天然化学物质的分离出来,一个柱头好多个月也是有的。

充压柱是一种比较好的方式,与自然压柱相近,只不过是另加工作压力使渗滤剂走的快些。工作压力的保证可以是空气压缩,双连球是较常用的手动式充压的方式。特别是轻易溶解的试品的分离出来中可用。工作压力不能过大,要不然有机溶剂走的太快便会降低分离出来实际效果。本人感觉充压柱在平常的有机物的分离出来中是较为适合的。

感受:过柱时是不是充压要深入分析,一般而言直徑较为粗的柱头用自然压就可以,因其横截面积的原因渗滤剂的流动速度已充足快。通常操纵柱头下方液态流动速度大概在0.5~1滴每秒钟的范畴比较合适。

缓解压力柱可以减小硅胶材料的需求量,觉得可以节约一半乃至大量,可是因为很多的气体根据硅胶材料会使有机溶剂蒸发(有时候在柱头外边有水蒸气凝固),及其有一些较为易溶解的物品很有可能无法得到,并且还务必与此同时应用离心水泵抽真空(非常大的噪声,并且时间长)。一般不建议应用。


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