柱层析硅胶厂家带您浅析其产品运用技巧有哪些
柱层析硅胶厂家小编带您了解其相关知识:硅胶层析法的别离原理是依据物质在硅胶上的吸附力不同而得到别离,一般情况下较大的物质易被硅胶吸附,较弱的物质不易被硅胶吸附,整个层析进程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸进程。依据填充基质和样品分配交流原理不同,离子交流层析,凝胶过滤层析和亲和层析是三种别离混合物的经典层析技能。
在运用柱层析硅胶时的几个技巧:
1、硅胶的运用
初做柱层析很容易把柱子装得长了或短了,有时还会有很多的硅胶剩余,糟蹋硅胶,这主要是对硅胶等固定相的运用的量没有掌握。柱层析用的硅胶一般是100-200目,100毫升硅胶的质量在47克左右,假如装一个直径是2.8厘米的柱子,能够装18厘米高。
2、洗脱剂的运用
洗脱剂的可用薄层层析来确定,一般以待别离样品Rf值为0.2-0.3为宜。选择的洗脱剂应该使两相邻物质Rf值之差大化。不要认为在板上爬得高别离的效果就比较好,假如Rf在0.6,即使相差0.2也不容易在柱子上分开,柱层析硅胶厂家认为因为柱子是一个屡次爬板的进程,能够通过公式的比较:0.6/0.8一次的别离度,肯定不如(0.2/0.3)的三次方或四次方大。
常用的展开剂性小的用乙酸乙酯:石油醚体系;性较大的用甲醇:氯仿体系;性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸体系;拖尾能够加入少量氨水或冰醋酸。对于很难别离的化合物,一是增加柱子的长度和直径,二是减小洗脱剂的性,这样能够很好地将混合物分开。
3、柱层析硅胶装柱子的技巧
柱层析的装柱非常重要,装柱的效果会直接影响层析别离效果。有湿法装柱和干法装柱等两种办法。湿法装柱很简单,运用也普遍,就是先用比固定相多一倍的洗脱剂将固定相活成匀浆,柱子底部先用脱脂棉塞紧,然后倒入洗脱剂将脱脂棉中气泡赶出。
处理的办法是:(1)固定相一定要增加健壮;(2)一定要用较多的溶剂“走柱子”。
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