浅析柱层析硅胶的几个技巧
柱色谱通常被称为柱色谱,是色谱中使用的方法之一。对于含有多种有机物质的混合样品,当无法再次结晶时,柱层析硅胶法可以说是有机实验中有效的分离方法。固定相的吸附柱通常用硅和氧化铝制成。硅胶色谱的分离原理是根据物质对硅胶的吸附能力来分离的。一般来说,极性物质容易吸附在硅胶上,极性弱的物质不容易吸附在硅胶上。整个色谱过程是吸附.解吸.再吸附.再次解吸的过程。
许多柱层硅胶化学实验书都描述了主层分析实验方法,但大多数数量被广泛描述,有些描述不适用于实验室。例如,许多书籍提到,安装柱子时,先在底部铺上石英砂,倒入固定桌子,然后在上面铺上石英砂。麻烦,效果不好,不适合实验室。本文根据多年使用柱层硅胶的操作经验,总结了使用柱层时的一些技巧。
使用柱层析硅胶
短层容易长或短装柱,有时会留下大量的硅,浪费硅,这主要是因为对硅等固定相的使用不确定。柱层分析硅一般为100-200目,100毫升硅质量约为47克,安装直径为2.8厘米的柱可容纳18厘米高。
使用洗脱剂。
洗涤剂的极性由薄层决定,一般应将样品Rf值分离为0.2-0.3。选用的洗涤剂应该在很大程度上扩大相邻两种物质Rf价值之间的差异。别以为在木板上爬得高就好了。Rf是0.然后,即使差距为0,.也很难从柱层分手。柱层是一个多次攀爬的过程,所以可以通过公式进行比较。0.6/0.8一次分离肯定不如(0.2/0.3)三次或四次方形。柱层硅胶有时应在薄层上看到分离效果,但越过柱层时很难分离。主要原因是薄层分析比柱层分析用硅细很多,所以分离效果很好。解决办法是降低税收制度的极性。一般来说,柱层分析中使用的洗涤剂比薄层分析中使用的展示剂的极性低一倍,可以达到好的分离效果。当分离物的极性范围较大时,可以使用梯度洗脱法逐渐增加溶剂的极性,逐一洗掉吸附在硅胶上的其他化合物。
常用的扩展剂极性低的乙酸乙酯:石油醚系统;极性甲醇:氯仿系统;极性甲醇:水:正丁醇:醋酸系统;拖车可以加入少量氨水或冰醋酸。对于难以分离的化合物,一是增加柱子的长度和直径,二是降低洗涤剂的极性,使混合物能够很好地分离。在同样可以清洗的情况下,使用毒性小的洗涤剂。比如乙酸乙酯:石油醚系统和二氯甲烷:石油醚系统在同样可溶性的情况下,应使用毒性小的乙酸乙酯:石油醚系统。此外,洗涤剂通过柱子后应注意。
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