柱层析硅胶实际应用综述

 色谱法，又称层析法.是一种以分配平衡为机理的分配方法，色谱体系包含两个相,一个是固定相,一个是流动相。当两相相对运动时，反复多次的利用混合物中所含各组分分配平衡性质的差异，达到彼此分离的目的。它是纯化和分离有机或无机物的一种方法。

色谱法按固定相的状态可分为柱色谱、平板色谱和棒色谱三种，而实验室和实际中常用的是柱层析硅胶和薄层硅胶板，以及它们之间的配合应用。

柱层析硅胶

吸附色谱原理

在一定条件下硅胶与被分离物质之间产生作用，这种作用主要是物理和化学作用,两种物理作用来自于硅胶表表面与溶质分子之间的范德华力，化学作用主要是硅胶表面的硅羟基与待分离物质之间的氢键作用。

柱层析硅胶的实际应用

以实验室为例具体的操作步骤如下：

硅胶的准备

准备一定数量的柱层析硅胶，如200-300目的规格。

实验仪器准备

一支玻璃色谱柱柱,一个铁架台,烧杯,锥形瓶，径口直径较大的玻璃漏斗,一支玻璃棒。

装柱

柱层析硅胶的加入

方法有干法和湿法两种，下面具体介绍操作方法。

①干法:将硅胶一次加入色谱柱，振动管壁使其均匀下沉，然后沿管壁缓缓加入开始层析时使用的流动相，或将色谱柱下端出口加活塞，加入适量的流动相，旋开活塞使流动相缓缓滴出，然后自管顶缓缓加入硅胶，使其均匀地润湿下沉，在管内形成松紧适度的吸附层。操作过程中应保持有充分的流动相留在硅胶的上面。

②湿法:将硅胶与流动相混合，搅拌以除去空气泡，徐徐倾入色谱柱中，然后再加入流动相，将附着于管壁的吸附剂洗下，使色谱柱表面平整。填装硅胶所用流动相从色谱柱自然流下，液面将柱表面相平时，即加试样溶液.